초록 close

배 경 : Protein kinase C (PKC)에는 diacylglycerol (DAG)에 의해 활성화되는 conventional type (PKC-α, -βI, -βII, -γ)과 novel type (PKC-δ, -ε, -θ, -η)외에 DAG에 의해 활성화되지 않는 atypical type (PKC-ζ, -ι)이 있다. Glucose 자극에 의한 fibronectin 생성 과정에 관여하는 PKC isoenzyme은 DAG에 의해 활성화되는 PKC로 알려져 있다. 본 실험에서는 사람의 복막중피세포에서 IL-1β 자극에 의한 fibronectin 생성의 신호전달 과정에 PKC가 관여하는 지와 그 isoenzyme에 대해 알아보고자 하였다.방 법 : Fibronectin mRNA 양은 northern blot assay로 측정하였고, 세포내 phosphorylated PKC ζ/ι 단백질 양은 western blot으로 비교하였다.결 과 : 복막중피세포를 PKC억제제인 calphostin C (500, 750, 1000 nM)로 전처치 한 다음 IL-1β (1 ng/mL)로 자극하였을 때 fibronectin mRNA 발현은 calphostin C 용량에 비례하여 억제되었다. 다른 PKC억제제인 GF109203X (1, 5, 10 M)도 IL-1β 자극에 의한 fibronectin mRNA 발현을 용량에 비례하여 억제시켰다. 반면에, conventional 및 novel PKC 자극제인 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)는 fibronectin mRNA 발현을 증가시켰다. PMA를 72시간 작용시켜 PKC를 소모시킨 상태에서 PMA를 다시 투여해도 fibronectin mRNA 발현이 자극되지 않는 반면, IL-1β (1 ng/mL)는 fibronectin mRNA 발현을 자극하였다. Myristoylated PKC ζ/ιpseudosubstrate (5, 10, 15, 20 M)는 IL-1β 자극에 의한 fibronectin mRNA 발현을 용량에 비례하여 억제시켰고, 20 M에서는 IL-1β 자극에 의한 fibronectin mRNA 발현을 완전히 억제하였다. 대조군으로 투여한 myristoylated PKC [19-27] pseudosubstrate (20 M)는 IL-1β 자극에 의한 fibronectin mRNA 발현에 영향을 주지 않았다. IL-1β 자극에 의해 PKC ζ/ι가 활성화되는 지를 보기 위해 시행한 western blot에서는 IL-1β 자극에 의해 PKC ζ/ι의 활성화된 형태인 phosphorylated PKC ζ/ι가 증가하였다.


=Atypical Protein Kinase C Mediates Interleukin-1β Induced Fibronectin Production in Cultured Human PeritonealMesothelial Cells (HPMCs)Won Seok Yang, M.D., Soon Bae Kim, M.D.Byung Sik Kim, M.D., Su-Kil Park, M.D.and Jung Sik Park, M.D.